【辰辉创聚生物】多克隆抗体定制|高效抗体制备|定制抗体服务

发布时间:2025-07-23 20:55  浏览量:1

多克隆抗体(Polyclonal Antibody)制备是当前生命科学与生物医学研究中的一项基础性技术实验。其核心在于通过动物免疫系统产生具有高亲和力和多表位识别能力的免疫球蛋白(IgG),用于后续科研、检测、验证等场景。

1. 抗原设计与合成策略

成功的抗体制备始于高质量的抗原。抗原设计是整个多克隆抗体定制流程的技术核心,主要包括抗原选择、表位预测、结构稳定性评估和免疫原性分析。
常见抗原形式包括:

合成多肽(含特定修饰或标签)

重组蛋白或蛋白片段

全细胞裂解产物或天然蛋白质

抗原与载体蛋白(如KLH、OVA)偶联能增强免疫原性,对低分子量或低免疫活性的抗原尤为关键。抗原纯度通常需要大于90%,并确保正确构象以保证免疫应答特异性。

2. 动物模型选择与免疫程序优化

多克隆抗体制备涉及多个实验动物模型的选择与优化。常用物种包括兔、小鼠、大鼠、山羊、鸡、绵羊、牛、猪、驴、骆驼等,具体选择依据抗原类型、抗体产量要求、后续应用平台等因素。

免疫流程一般包括:

初次免疫(结合佐剂)

多次加强免疫

血清采集(预免+不同时间点免疫后血)

效价评估(ELISA、WB、IHC)

免疫周期可根据项目紧急程度进行调整。标准流程为6–8周,加急流程最快3周内可获得初代抗体。

3. 抗体提取与纯化工艺

血清采集后,需通过高效分离手段提取并纯化抗体,以提升实验性能与一致性。常用的多克隆抗体纯化方式包括:

Protein A/G 纯化:适用于大多数哺乳动物来源IgG,具备高回收率;

抗原亲和纯化:使用抗原偶联柱特异富集目标抗体,提升特异性;

离子交换或透析:用于缓冲体系置换或进一步浓缩;

最终纯度与浓度需根据应用需求定制调整(如免疫组化、高通量检测等)。

4. 质量控制与交付规范

多克隆抗体制备的质量控制标准化直接影响下游实验可靠性。关键质控项目包括:

抗体效价检测(ELISA)

蛋白浓度测定(BCA)

纯度评估(SDS-PAGE)

特异性验证(Western Blot、IHC)

批次一致性确认

此外,为适应多平台兼容性,可选择冻干粉、缓冲液等多种抗体形式,满足长期保存和重复使用需求。

常见问题 FAQ

Q1:多克隆抗体为什么更适合快速项目启动?
A:由于其制备周期短、成本较低且识别多个表位,适用于高通量筛查与信号放大实验,特别适合科研初期探索性阶段。

Q2:如何选择免疫动物物种?
A:应结合抗原种属、抗体应用平台及预期产量综合判断。常用兔源抗体通用性强,鸡源适合跨种属识别,大动物(如山羊)适合大批量采血。

Q3:抗体纯化是否必要?
A:取决于实验精度要求,原始血清适合探索实验,亲和纯化抗体更适合IHC、WB等对背景要求较高的实验。

Q4:多克隆抗体与单克隆抗体制备在技术上有何本质区别?
A:多克隆抗体来源于多个B细胞群体,识别多表位,信号强;而单抗来源于单个细胞克隆,特异性高,但制备周期长、成本高。